本文主要针对载体和质粒的区别,质粒和基因表达载体有什么区别?和质粒载体和重组质粒载体的区别等几个问题进行详细讲解,大家可以通过阅读这篇文章对载体和质粒的区别有一个初步认识...
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1、概念不一样
质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的DNA分子。
载体:某些能传递能量或运载其他物质的物质。
2、存在不一样
质粒广泛出现生物界,从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人类机体中都含有。
载体只作为两个物质当中沟通的桥梁。
质粒是将外源基因送入细胞的东西。故此,说质粒基因表达载体最主要部分。就像运输车,而运输车不可能是空空的吧,应该装有东西,假设装了不少东西,就叫基因表达载体,上面主要装有开始子,终止子,目标基因等!
这里说的穿梭,即就可以以在真核(比如酵母)中复制,又可在原核(比如大肠杆菌)中复制,既含有真核和原核的复制开始位点 表达质粒载体:质粒载体的意思就是以质粒作为载体(对应的是病毒载体),而表达是这个载体的主要目标是要导入到受体细胞表达出产物(对应的是克隆载体)
克隆载体是可以通过限制性内切酶,将目标DNA片段整合进去,还可以转入宿主细胞进行表达的生物DNA。 一般采取从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入适合大小的外源DNA片段,并注意不可以破坏载体的自我复制性质.将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中非常多繁殖.常见的载体有质粒,噬菌粒,酵母人工染色体。 对载体的要求:
(1)能在宿主细胞中复制繁殖,而且,最好要有非常高的自主复制能力.
(2)容易进入宿主细胞,而且,进入效率越高越好.
(3)容易插入外来核酸片段,插入后影响不了其进入宿主细胞和在细胞中的复制.这个问题就要求载体DNA上要有适合的限制性核酸内切酶位点.
(4)容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才方便重组操作.
(5)有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或带上着外来的核酸序列进入宿主细胞都可以容易被辨认和分离出来。
1)具有较小的分子量。经验表达,为了不要在DNA的纯化途中出现链的断裂,克隆载体的分子大小最好不要超越10Kb。
pBR322质粒这样的小分子量的特点,不仅易于自己DNA的纯化,而且,可容纳很大的外源DNA片段;
(2)具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是不是进入宿主细胞还有外源DNA分子是不是插入载体分子形成了重组子。
标记基因时常可以赋予宿主细胞一种新的表型,这样的转化细胞可明显地区别于非转化细胞。
当我们把一个DNA片段插入到某一个标记基因内时,该基因就失去了对应的功能。
当把这样的重组DNA分子转到宿主细胞后,该基因原来赋予的表型也就消失了。
要是然后一直保存了原来表型的转化细胞,细胞内含有的DNA分子一定不是重组子。
很明显,既要指示外源DNA是不是进入了宿主细胞,又要指示载体DNA分子中是不是插入了外源DNA片段,既然如此那,这样的载体一定要至少具有两个标记基因。
此外pBR322质粒载体还具非常高的拷贝数,而且,经过氯霉素扩增后面,每个细胞中可累积1000~3000个拷贝,这个问题就为重组体DNA的制备提供了非常大的方便。
真核细胞的纤毛或鞭毛基底部由微管及其有关蛋白质构成的短筒状结构。与中心粒的结构十分相似是轴丝生长的根基。载体(vector) ,能载带微量物质共同参加某种化学或物理过程的常量物质,在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目标基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最经常会用到的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。载体的化学实质是DNA,较少数是RNA。而基体的化学实质是蛋白质。
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